大T抗原是SV40病毒产生的多种功能蛋白质

将被SV40 DNA肿瘤病毒转化的小鼠细胞注射到具有清楚遗传背景的小鼠体内时（同系宿主)，宿主的免疫系统将产生强烈反应，并针对只在被病毒转化的细胞中存在而正常小鼠细胞中不存在的核蛋白产生抗体。出国看病机构爱诺美康了解到，这种蛋白质称为大肿瘤抗原，由病毒基因组的一段区域编码。A该病毒感染猴肾细胞并在其中复制时也会表达同样的蛋白质。作为宿主的猴肾细胞允许病毒在其中完成整个感染（裂解）周期的完成。

出国看病机构爱诺美康介绍，大T抗原是SV40病毒产生的具有多种功能的蛋白质，用来扰乱被感染或者转化细胞的调控通路。实际上，己经提到过大T抗原，它能与pRb结合并且使其功能失活。从携带SV40诱导肿瘤的小鼠或者仓鼠中获得的抗大T血清，早在1979年，就被用来检测在SV40转化细胞中该蛋白质的存在。这个免疫沉淀物中除了大 T，还包含一个与其相互作用的蛋白质，分子景为53〜54kDa。使用p53蛋白的抗血清能在小鼠胚胎肿瘤细胞中检测到这种蛋向的存在，随后也在许多从未感染过 SV40的人类和啮齿类肿瘤细胞中检测到了这种蛋白。但是，用只识别大丁的单克隆大T抗原（LT)结合的抗体可以被用来检测 SV40转化的肿瘤细胞核内的LT。在此图中， 这个抗体用于对SV40,即早基因区域和其他两个莪因转化的人乳腺上皮细胞（MEC)进行染 色。对由SV40转化的小鼠细胞染色也可以得到类似的图像。这种方法将抗体与过氧化物酶偶 联来检测LT，通过产生暗棕色的斑点进行观察。 在此图的肿瘤组织中，被转化的MEC形成管状(见横切面)，它的周围则是正常的间质细胞（浅蓝色细胞核）。

抗体能免疫沉淀到病毒感染的细胞中存在这一53〜54kDa的蛋白质，而在未被病毒感染的细胞中则检测不到。

出国看病机构爱诺美康介绍，综上所述，这些发现揭示了在SV40转化的细胞中表达的大T抗原能和一种新发现的蛋白质结合，这种蛋白质被命名为p53 (图9.2B)。能同时与大T及p53反应的血清可以p53的发现及其余SV40大T的结合（A)普通的BALB/c 3T3小鼠成纤维细胞（3T3)及 F9胚胎肿瘤细胞（EC)被SV40转化后，用35S-甲硫氨酸处理，产生的裂解液和普通的仓鼠血淸（N)或者被SV40转化的仓鼠细胞免疫产生的仓鼠抗血淸（T)孵育。病毒感染的3T3细胞可以与抗肿瘤血淸免疫共沉淀一个大约94kDa的蛋白质，而未感染的3T3细胞则不行。另外，另一种在54kDa附近的蛋白质也同样只能在病毐感染的3T3细胞中被检测到。同时，这种蛋白质也能在F9细胞中被免疫共沉淀，无论K•是否被SV40细胞感染（箭头所指)。这个数据并没有直接证明SV40大T蛋白（94kDa 蛋白）与p53蛋111有物理作用，但是证明了p53在两种不同的转化细胞中的表达都有提高。此外，这 些数据还表明，在由SV40转化的仓鼠细胞中，其p53水平的升高引起了仓鼠免疫系统对大T及仓鼠本身p53产生免疫反应。（B) X射线晶体衍射M示，SV40大T分了•组装进p53同源六聚体中，它的每个组分结合到一个单独的p53分，并将之束缚。

参考目录：

（A，from D.I.Linzer and A.J.Levine，CW/17: 43-52，1979. B，from D. Lietal.，423: 512-518，2003.)

（Courtesy of T. A. Ince.)