自杀基因NTR/CB1945对癌细胞杀伤作用的研究

NTR基因是一种非常具有应用前景的自杀基因，它作用的前体药物是CB1945。出国看病机构爱诺美康了解到，该物质是一种温和的单功能烷基化合物，可在硝基还原酶和DT硫辛酰胺脱氢酶的催化下生成双功能烷基化合物引起DNA交联。该自杀系统对静止期的癌细胞也有杀伤作用。腺病毒为载体携带NTR的临床试验也显示了其有效性和安全性。

自杀基因治疗还可通过旁观者效应发挥细胞毒杀伤作用。出国看病机构爱诺美康了解到，旁观者效应指在用外源自杀基因转染肿瘤细胞后，未被转染的肿瘤细胞可因邻近的少数肿瘤细胞携带有自杀基因被杀伤，此效应明显放大了自杀基因的杀伤作用。

Alvarez等体外实验证实，10%的细胞转导了逆转录病毒携带基因，可造成70%以上卵巢癌细胞的死亡。

目前认为旁观者效应机制主要与以下几个方面有关:

①  细胞间缝隙连接介导的细胞毒性药物传递，能够促进连接蛋白表达的药物有可能增强旁观者效应;

②  细胞凋亡后产生的凋亡小泡可以包裹前药代谢产物，这些小泡被邻近的非转导的肿瘤细胞吞噬后导致后者死亡;

③  肿瘤细胞中外源基因的导入及表达增强了其自身的免疫原性，诱导机体产生一定的抗肿瘤免疫反应，同时细胞凋亡也可诱发免疫反应;

④  肿瘤内的新生血管内皮细胞由于转染TK基因后死亡，造成肿瘤因缺血坏死;

⑤  “旁分泌”机制，自杀基因的毒性产物通过自由扩散的方式对周围细胞发挥杀伤作用;

⑥  “远处旁观者”效应，Ccmsalvo等首先发现了远距离旁观者效应，用CD转导的肿瘤细胞接种在鼠的一侧皮下，给予5-Fc后，可使肺内的转移灶消退。

由于基因转染效率低和缺乏肿瘤特异性，自杀基因在体内对肿瘤直接杀伤作用较小，因而旁观者效应起着十分重要的作用。

Freeman曾提出两种方法增强旁观者效应：

①在导入自杀基因前先给患者接种已知的肿瘤抗原;

②联合应用细胞因子基因加强免疫炎症反应。目前已有如下报道:CD基因与IL-6基因联合;CD基因与IL-2基因联合;HSV-TK基因与IL-2基因联合应用;HSV-TK基因、IL-2基因与CM-CSF基因联合等。

一方面，自杀基因的表达产物及旁观者效应可直接杀伤一部分肿瘤细胞，另一方面细胞因子基因的表达可进一步激发机体的抗肿瘤免疫功能，被杀伤的携带细胞因子的肿瘤细胞又可作为疫苗进一步激发机体的免疫功能，从而达到治疗肿瘤的目的。

目前自杀基因治疗肿瘤已获得较满意的效果，有的已应用于临床取得较好的疗效。出国看病机构爱诺美康介绍，开发新一代载体、研究新的自杀基因系统及多种疗法的联合应用有助于进一步提高自杀基因治疗的疗效。