siRNA对EGF-R表达的抑制作用研究

一项研究揭示，siRNA对EGF-R表达的抑制作用，EGF-R受体结构性突变的非小细胞肺癌细胞对易瑞沙和特洛凯治疗，产生显著反应的原因还不清楚。出国就医机构爱诺美康了解到，当体外培养时，两种过表达正常结构（即野生型）EGF-R的NSCLC细胞系相对抵抗易瑞沙治疗（橘色，红色），但是另外两种表达一种替换氨基酸（蓝色）或部分缺失（绿色）受体蛋的NSCLC细胞系中，它们对药物杀伤大约敏感100倍。

出国就医机构爱诺美康介绍，通过外源表达能够抑制EGF-RmRNA的siRNA来消除EGF-R表达，证实了这些差异存在的生物学机制。表达野生型EGF-R的H358细胞（左侧3条柱形）无论使用靶向所有受体形式（绿色）的siRNA，还是只靶向两种突变受体的siRNA，都没产生显著影响（黄色，红色)。但是，特异性靶向编码部分缺失型受体（delE746,黄色）mRNA的siRNA能够使约80%表达这一突变受体的肿瘤细胞失去活力（中间柱形），而对表达氨莶酸置换型突变受体的细胞没有影响（红色，中间柱形）。

相反，将特异靶向氨基酸置换型突变受体（右侧柱形）的siRNA导入细胞能使细胞失去活力，而在这种细胞中导入靶向缺失型突变受体的siRNA则不会产生这种效应。在这两种EGF-R突变细胞中导入靶向所有形式受体（绿色柱形）的siRNA也能导致大量细胞死亡。

因此，携带突变型受体的两种NSCLC细胞对EGF-R功能具有依赖性（“成瘾”)，而表达野生型受体的NSCLC细胞对EGF-R功能的依赖并不显著。

出国就医机构爱诺美康介绍，组图中siRNA治疗产生的细胞活力丧失是由于特异性地诱导凋亡发生的，这通过特异抗体对固定细胞中剪切激活的caspase3进行免疫染色的实验己经证实。ChNSCLC细胞用DAPI染色显示核和细胞数量。