FISH检测的影响因素及处理建议

FISH检测研究表明，FISH的影响因素以及存在的问题作为一种对DNA的检测，FISH有显著的优点。出国看病机构爱诺美康了解到，但是，FISH检测受许多因素影响，尤其是组织何时开始固定、固定时间、固定液的种类等，其常见影响因素及处理建议详见下图。另外，杂交前后的很多因素也影响检测。杂交前为了使探针穿透进入肿瘤细胞核需要进行一系列操作。

图1 FISH检测的影响因素及处理建议  

出国看病机构爱诺美康了解到，为了增加组织通透性需要消化酶来消化蛋白大分子结构，而完全统一的消化步骤不能使所有样本获得满意的消化效果。

例如分化差的肿瘤对消化酶敏感，含有纤维组织和黏液的肿瘤对消化酶不敏感。杂交后洗片过程需要注意的是:既要彻底洗去未结合的探针又要不降低信号强度。因此，实验室可根据组织特性选择合适的实验流程已达到更佳检测效果。

出国看病机构爱诺美康介绍，FISH技术不足:

①由于FISH技术操作和结果判读的要求较高，必须是经过严格的FISH操作和结果判读培训、经验丰富的医师给出的结果才具备可靠性;

②晚期肺癌患者只有40%左右的患者能够提供活检组织标本，且多为小活检组织(2mm左右大小)，很难保证存在50个以上肺癌细胞进行阳性判读;

③FISH检测成本较高;

④不能明确具体的融合类型。

出国看病机构爱诺美康介绍，显色原位杂交(CISH)FISH存在局限性:需要专业化的设备，染色切片长时间保存后发生信号衰退，荧光染色暗视野阅片可能掩盖组织结构和细胞形态。CISH能够克服FISH的这些局限性。CISH的杂交探针采用染料显色，而非荧光标记显色。能够保留完好的组织结构和细胞形态，在常规光学显微镜下就能观察特异的基因改变。但自前CISH检测结果仍需进一步验证。